单位 : 个
免疫组化用
湿盒具有两个作用。一是保湿。在BSA封闭之后,加一抗,一般是37°C一小时,或者室温2小时,或者4°C过夜。无论怎样,时间都比较长,抗体容易干掉,干掉之后染色或者荧光就标不出了。所以,加入一抗之后,放入一个可以密封的盒子里,再放一些湿的滤纸或者海绵,可以有效的防止片子干掉。二抗同理。二是避光。有些二抗上面的发光剂需要避光,否则荧光容易淬灭。湿盒一般是用不透明的材料做的,盖上盖子之后可以保证一个暗室环境。
湿盒使用方法
第一步,信号源(膜)的放置:将用发光液孵育过的膜放置在暗盒的中间位置,将一层透明薄膜覆盖在膜上;
第二步,调试适当的红外光强度,将暗室中其它的灯光关闭,使暗室中只存在红外光,在红外光的条件下取出胶片,裁剪合适大小,做好标示,正压在膜上,然后盖上暗盒,计时。
第三步,取出暗盒中的胶片进行显影等操作。
注意事项
1,保持暗盒表面和内部的干净整洁,因为污物有可能会有荧光信号,对结果造成不利影响。
2,暗盒的使用时注意白光和红外光的分段,在压胶片收集信号时,暗盒的放置位置尽可能的避免白光照射。
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