· 英文名称 : Hoechst 33258
· CAS : 23491-45-4
· 分子式 : C25H24N6O·3HCl
· 分子量 : 533.88
· 储存条件 : −20℃
· 纯度 : ≥98% (TLC和HPLC)
· 外观(性状) : 黄色或绿色粉末
· 单位 : 支
别名:2'-(4-Hydroxyphenyl)-5-(4-methyl-1-piperazinyl)- 2,5'-bi(1H-benzimidazole) trihydrochloride;2-[2- (4-Hydroxyphenyl)-6-benzimidazoyl]-6-(1-methyl-4- piperazyl)benzimidazole trihydrochloride;HOE 33258; Hoechst 33258
说明:荧光色素;用于DNA、染色体和核酸的染色;荧光染色法和免疫荧光技术。Hoechst 33258 是一种可以穿透细胞膜的蓝色荧光染料,它在嵌入双链 DNA 后释放强烈的蓝色荧光,对细胞的毒性较低。Hoechst 33258 常用于细胞凋亡检测,染色后用荧光显微镜观察或流式细胞仪检测,也可以用于普通的细胞核染色,或常规的DNA染色。
物理性状:黄色至深黄色粉末;溶于水,黄或棕色溶液,参考浓度为9.80 - 10.20 mg/ml;熔点>300℃。
用途:细胞遗传学研究的常用试剂,荧光染色细胞的DNA ,插入DNA的A-T区,具有低的细胞毒性,形成膜渗透性荧光DNA链。
用于细胞核染色时,推荐的Hoechst 33258工作浓度为0.5-10μg/ml。
配制母液
Hoechst 33258溶于水,溶解度可达10mg/ml。因此可配制成10mg/ml的母液于4℃避光保存。
注意事项
1) Hoechst 33258 对人体有一定刺激性,请注意适当防护。
2) 荧光染料都存在淬灭的问题,建议染色后尽量当天完成检测。
3) 为减缓荧光淬灭可以使用抗荧光淬灭封片液。
4) 为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
使用方法
1. 用PBS或合适的缓冲液制备10~50µM Hoechst 33258染色液。
2. 固定的细胞或组织染色:
对于固定的细胞或组织样品,固定后,适当洗涤去除固定剂。随后如果需要进行免疫荧光染色,则先进行免疫荧光染色,染色完毕后再按后续步骤进行Hoechst33258染色。如果不需要进行其它染色,则直接进行后续的Hoechst 33258染色。
a) 对于贴壁细胞或组织切片:加入适量Hoechst 33258染色液,覆盖住样品即可。对于悬浮细胞:至少加入待测染色样品体积3倍的染色液,混匀。室温放置3-5分钟。
b) 吸除Hoechst 33258染色液,用TBST、PBS或生理盐水洗涤2-3次,每次3-5分钟。
c) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
3. 活细胞或组织染色:
a) 细胞培养物中加入适量Hoechst 33258染色液,约1/10细胞培养基体积,必须充分覆盖住待染色的样品。通常对于六孔板一个孔需加入1ml染色液,对于96孔板一个孔需加入100μl染色液。
b) 在 37℃培养细胞 10~20 分钟。
c) 用 PBS或合适的缓冲液洗细胞两次。
d) 直接在荧光显微镜下观察或封片后荧光显微镜下观察。激发波长350nm,发射波长460nm。
浓度 | |
规格 | 25mg |
保存 | −20℃ |
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