可定性、定量检测动物组织、蜂蜜、牛奶等样品，采用硝基呋喃类代谢物四合一处理方法，衍生时间可短至3h,灵敏度0.025μg/kg。

产品货号	产品名称	灵敏度	检测限	规格	检测项目	备注
HE09201-2	呋喃妥因代谢物ELISA检测试剂盒	0.05μg/kg	0.1μg/kg	96孔	生鲜乳蜂蜜

一、产品概要
  硝基呋喃类药物因有非常好的抗菌作用和药动力学的特性，曾经被广泛应用，作为禽类、水产和猪促生长的添加剂。但在长时间的实验研究过程中发现，硝基呋喃类药物和代谢物均可以使实验动物发生癌变和基因突变，正因为如此才导致此类药物禁止在治疗和饲料中使用。呋喃妥因在1995年被禁用。
  用来检测呋喃妥因代谢物的最常用方法是LC-UV，LC-MS和LC-MS/MS。酶联免疫方法结合了色谱技术，采用AHD衍生物的特异性抗体，具有很高的精确度和灵敏度，较低的操作技术要求和短暂的检测时间，检测样品量大等特点在检测中很好的表现出来。
本试剂盒是应用ELISA技术研发而成的检测产品，能最大限度地减少操作误差和工作强度。
二、试验原理
  本试剂盒采用直接竞争ELISA方法，在酶标板微孔条上预包被抗呋喃妥因代谢物抗体，样品残留的呋喃妥因代谢物和呋喃妥因酶标物抗原竞争抗呋喃妥因代谢物抗体，经TMB底物显色，样品吸光度值与其残留物呋喃妥因代谢物呈负相关，与标准曲线比较再乘以其对应的稀释倍数，即可得出样品中呋喃妥因代谢物的含量。
三、适用范围
可定性、定量检测动物组织（鱼肉、虾肉、鸡肉、猪肉、肝脏）蜂蜜、牛奶等样品中的呋喃妥因代谢物的残留量。
四、交叉反应率
呋喃妥因代谢物：100%
呋喃它酮代谢物：小于 0.1%
呋喃唑酮代谢物：小于 0.1%
呋喃西林代谢物：小于0.1%
五、包装组成
酶标板、标准品×6瓶、高浓度标准品、呋喃妥因代谢物酶标物、底物液A液、底物液B液、终止液、浓缩洗涤液、呋喃妥因代谢物浓缩样品稀释液、衍生化试剂
六、样品前处理步骤
（一）组织、蜂蜜前处理方法（呋喃四合一方法，衍生16h）：
均质样品；称取均质后的样品, 分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，充分振荡；过夜孵育；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；再加入乙酸乙酯，剧烈振荡；离心；取上层乙酸乙酯氮气吹干；加入样品稀释液和正己烷，涡动，充分混匀；离心；除去上层有机相，取下层水相用于分析。
（二）组织、蜂蜜前处理方法（呋喃四合一方法，衍生3h）：
均质样品；称取均质后的样品, 分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，充分振荡；65℃孵育3h；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；再加入乙酸乙酯，剧烈振荡；离心；取上层乙酸乙酯氮气吹干；加入样品稀释液和正己烷，涡动，充分混匀；离心；除去上层有机相，取下层水相用于分析。
（三）牛奶前处理方法（呋喃四合一方法，衍生16h）：
取牛奶样品，离心，吸除上层脂肪；取出去除脂肪牛奶样品至玻璃离心管中；分别加入C液和D液；振荡混合，离心；取牛奶的离心上清液至聚苯乙烯离心管中，分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，充分振荡；在过夜孵育；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；再加入乙酸乙酯，剧烈振荡；离心；取上层乙酸乙酯至干燥的试管中，氮气吹干；加入样品稀释液，涡动，再加入正己烷，涡动，充分混匀；离心；除去上层有机相，取下层水相用于分析。
（四）牛奶前处理方法（呋喃四合一方法，衍生2h）：
取牛奶样品，离心，吸除上层脂肪；取出去除脂肪牛奶样品至玻璃离心管中；分别加入C液和D液；振荡混合，离心；取牛奶的离心上清液至聚苯乙烯离心管中，分别加入盐酸溶液和衍生化试剂，充分振荡；65℃孵育3h；加入氢氧化钠溶液和磷酸氢二钾溶液，振荡混匀；再加入乙酸乙酯，剧烈振荡；离心；取上层乙酸乙酯至干燥的试管中，氮气吹干；加入样品稀释液，涡动，再加入正己烷，涡动，充分混匀；离心；除去上层有机相，取下层水相用于分析。
七、检测步骤
1、将所需试剂回温；
2、取需要数量的微孔板；
3、洗涤工作液在使用前也需回温；
4、将样品和标准品对应微孔按序编号；
5 加标准品/样品；
6、洗板；
7、显色；
8、测定。
八、结果判定
粗略判定：用样品的平均吸光度值与标准值比较即可得出其浓度范围；
定量判定：定量分析
九、检测方法灵敏度、准确度、精密度
试剂盒灵敏度：0.025ppb
精密度：试剂盒的变异系数均小于10%
十、贮藏条件及保存期
贮藏条件：保存试剂盒于2~8℃。
保存期：该产品有效期为12个月。

规格	96孔
灵敏度	0.05μg/kg

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