· 别名 : 2,3,5-三苯基氯化四氮唑;四氮唑红;红四唑
· 英文名称 : TTC 2,3,5-Triphenyl-2H-Tetrazolium Chloride
· CAS : 298-96-4
· 分子式 : C19H15ClN4
· 分子量 : 334.81
· 储存条件 : 2-8℃ 干燥避光保存
· 纯度 : ≥98%
· 外观(性状) : 白色结晶粉末
· 单位 : 瓶
2,3,5-氯化三苯基四氮唑,又称四唑红,简称TTC,TTZ,或TPTZ,一种脂溶性光敏感复合物,即可用来检测种子的生存能力,也可用来检测哺乳动物组织的缺血梗塞。检测机制在于TTC本身可作为一种氧化还原指示剂,活细胞内的脱氢酶(尤其是线粒体内的琥珀酸脱氢酶)可以将TTC还原为红色甲臢化合物TPF(1,3,5-triphenylformazan)。对于种子或者植物组织来说,染色结果为活组织被染成不同程度的红色,死组织或者无生命力的组织不着色。对于缺血梗塞组织,因组织坏死脱氢酶活力丧失呈现苍白色,而正常组织呈深红色。TTC常用的染色浓度为2%(w/v)(货号:G3005),也可根据组织类型做浓度的适当调整。
染色方法
1.1 染色工作液的配制
TTC通常用磷酸缓冲盐溶液来配制,pH范围为6.5-7.5之间,常用的工作浓度为2%,也可用1%或者更低的浓度,根据自身实验体系调整。
可使用以下的缓冲盐体系配制:
1)取9.078g KH2PO4(Mw:136.09)溶于1L去离子水内,制备成66.7mM KH2PO4储存液;取9.472g Na2HPO4·H2O(Mw:137.99)溶于1L去离子水内,制备成68.6mM Na2HPO4储存液;将两份KH2PO4储存液与1份Na2HPO4储存液充分混合,即得到需要的磷酸缓冲液溶液。
2)根据需要的TTC工作液浓度来制备,如加入2g TTC粉末到100ml混合的磷酸盐缓冲液中,即得到2%的染色工作液。此时的溶液pH值在6.5-7.5之间。此工作液可装到不透明的白色瓶或者棕色瓶子内,4℃保存几个月稳定。
【注意:TTC染色液的缓冲体系可根据自己的实验习惯来调整;也可用去离子水来溶解配置成10mg/ml的储存液,过滤除菌,建议此法染色液当天使用。】
1.2 染色方法(动物组织)
1)取新鲜组织切片放到装有TTC染色液的染色容器内,37℃避光孵育15-30min,边孵育边观察颜色变化;【注意:TTC染色液可重复使用2-3次,可将用过的TTC染色液放到新的容器内继续使用。】
2)【可选】轻柔的吸取缓冲液(如1×PBS)将组织表面多余的染色液冲洗掉;
3)此时即可观察或者拍照。若需长久保存,用4%多聚甲醛溶液(货号:P1110)固定10-20min。
注意事项
1)本品具有微量的光和热敏感性,使用以及存放的过程中避免长时间曝光或者接触到过高温度下。
2)为了您的安全和健康,请穿实验服并戴一次性手套操作。
浓度 | |
规格 | 1g |
保存 | 2-8℃ 干燥避光保存 |
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