· 英文名称 : Epoxy activated Sepharose 6B
· 单位 : 瓶
说明:分离试剂
产品简介
环氧活化-琼脂糖凝胶6B以6%琼脂糖凝胶为基质,采用环氧活化的方法激活琼脂糖上的羟基,活化后即可直接用于各种配基的偶联。
可用于各种含有氨基、巯基或羟基的亲和配基(蛋白质、多肽、氨基酸或糖等)的偶联。具有使用方便、偶联条件温和、偶联效率高和应用范围广的特点。
GRADE:BR
基质:6%高度交联琼脂糖凝胶
功能基团:epoxy
配基密度:20-40μmoles/mL drained
matrix
平均粒径:90μm
最大流速:300cm/h
偶联条件:pH8-10,温度 4-45°C,时间1-16小时,可在水相和有机相中偶联
用途:亲和层析介质
性状:白色胶体;
储存温度:4-8°C
使用说明:
1、溶液的准备
偶联液:0.1M Na2CO3, pH8.5-10.0
封闭液:1M 乙醇胺,pH8.0
清洗液1:0.1M 乙酸-乙酸钠,0.5M NaCl,pH4.0
清洗液2:0.1M Tris-HCl,0.5M NaCl,pH8.0
保护液: 含20%乙醇的1XPBS
2、样品准备
样品用偶联液溶解,浓度约5-10mg/ml。
3、样品偶联
1) 取适量的环氧活化-琼脂糖凝胶6B,去除保护液,离子水清洗三次,用偶联液清
洗一次。
2) 将溶解好的样品中溶解后转入清洗好的环氧活化-琼脂糖凝胶6B 中,填料:样品
溶液体积比约为1:1。
3) 25-40℃摇床中振荡混合反应24h。注:确保树脂悬浮起来,否则会大大影响偶联效率。
4) 反应完后收集偶联样品,以便检测偶联效率。偶联液清洗一遍。
5) 加入等体积的封闭液,37 度振荡混合反应1h。
6) 将上述反应体系取出,流干其中的溶液,用3 倍柱体积的去离子水清洗树脂,清洗液1、去离子水、清洗液 2 和去离子水重复冲洗2 次,然后保存在等体积的保护液中,于2℃-8℃保存。
注意事项:
1.不同配基的偶联方法与上面类似,但是反应的条件例如:配基加入量,反应时间,反应温度应根据配基的不同进行适当的调整;
2.可用碳酸盐、硼酸盐和磷酸盐缓冲液做为偶联缓冲液,但绝对不能使用含有氨基的Tris、甘氨酸的缓冲液。
浓度 | |
规格 | 25ml |
保存 |
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