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聚焦|液相色谱柱

2018-04-25 10:25四面体科技

液相色谱仪由检测器、高压液体泵及液相色谱柱等三部分组成，其中液相色谱柱的正确安装和使用，是液相色谱工作的关键;同时也是液相色谱工作者获得正确且可靠的实验数据的必经之路。

1.色谱柱的构造

柱管、压帽/卡套、筛板（滤片）、接头

分析型：常规分析柱（4.0/3.9mm、4.6mm），窄径柱（1.0mm、2.1mm），毛细管柱（0.2-0.5mm）

制备型：半制备柱（〉5mm，7.8mm、9.8mm、10mm）、制备柱（21.2mm、30mm、50mm）

保护柱：保护柱套、保护柱芯

2.色谱柱填料基质编辑

（1）硅胶基质- pH 2-8 ------------------高或低pH下,硅胶会溶解

（2）Al2O3 . nH2O - pH1-14-----------化学修饰困难

（3）聚合物基质- pH1-14-------------孔结构复杂,孔径不均匀导致柱效不够高,有机溶剂可能导致聚合物基质溶涨而受损

3.性能影响因素编辑

A:物理因素

（1）硅胶纯度----• 填料硅胶的纯度与残留金属离子浓度

（2）色谱柱尺寸---• 填料床的长度和内径

（3）颗粒形状------• 球型或不规则型

（4）粒径------------• 平均颗粒直径, 通常3-10µm

（5）表面积---------• 颗粒外表面和内部孔表面的总和, 以m2/gram表示

（6）孔径------------• 颗粒的孔或腔的平均尺寸, 范围80-300Å

B：化学性质

（1）键合类型-----• 单体键合-键合相分子与基体单点相连

（2）碳覆盖率------• 与基体物质相连的键合相的量

（3）封端------------• 键合步骤之后, 用短链将裸露的硅羟基键合后封闭起来

4.如何推荐色谱柱编辑

在选择色谱柱之前，先多了解自己的样品和杂质，他们的类型结构、极性、酸碱性、分子量大小等等，

（1）样品是极性的且弱酸性的；就可以选择C18在100%酸性水溶液条件下检测，即要选择承受100%纯水且对极性化合物保留很好的色谱柱

（2）如果样品极性太强，或酸性太强；可以选择CN，NH2，或硅胶柱，HILIC（亲水色谱），也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱（缺点是离子对试剂平衡时间长，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验，另外离子对试剂很难洗下来，基本上用了离子对的色谱柱就不能再用于其它实验）

（3）若样品是碱性的；可选择高纯硅胶柱（高纯硅胶缺少金属杂质，且硅胶端基封尾）或一些经过修饰的C18柱（如极性嵌入技术或碱去活技术等），他们都会减少碱性化合物的拖尾，一般会选择中性或偏碱的条件下做，因为这样可增加碱性样品的保留

（4）如果碱性化合物的极性太强，或碱性太强；可以选择宽pH的C18色谱柱在高pH值检测（优点是方法开发简单，缺点是目前实现这一技术的色谱柱品牌比较少，价格也高）或者选用HILIC色谱柱（硅胶柱在反相条件下使用，这也是很经典的检测碱性样品的方法）选择强离子交换柱（缺点是不能用来分析其它样品，对流动相pH要求比较精密，否则很难重复实验）也有使用C18+强阴离子对试剂或强阴离子交换色谱柱。

5.色谱柱GP-C18

GP-C18以全覆盖的键合硅胶为填料，具有优异的稳定性。独特的单官能团化学键合技术可避免形成复合的C18分子层。均匀的涂层确保了固定相具有高选择性和高效率的分离特点。

GP-C18填料技术参数：硅胶：球形,高纯度(<10ppm金属杂质)、孔径：120Å、

粒径：1.8、2.2、3、4、5、7和10µm

孔体积：1.0mL/g

比表面积：300m²/g

固定相结构：单层全封尾

碳载量：17%

PH值范围：2-11[1]

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行业应用

企业一直保持良好的发展态势。多年来公司凭借技术研发和产品创新优势以及成功的市场开拓，不仅技术水平和经营规模上初步确立了在国内色谱分离和有机样品前处理领域的重要地位。公司的固相萃取，中压快速纯化色谱和液相色谱柱等主打产品在国内市场均有一定的占有率。

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